Ana Cristina Bolaños Rojas
Ana cristina Bolaños Rojas, aluna do Programa de Pós-Graduação em Biodiversidade Vegetal e Meio Ambiente,
defendeu no dia 19 de fevereiro de 2016 sua tese de doutorado intitulada
“Diversidade do gênero Ganoderma Karst. (Ganodermataceae) e atividade enzimática de espécies que ocorrem em leguminosas no Brasil e Colômbia ”.
A banca examinadora foi composta pela sua orientadora Dra. Vera Lúcia Ramos Bononi (Instituto de Botânica), Dra. Luciana Jandelli Gimenes (Universidade de São Paulo, Escola Politécnica, CEPEMA), Dra. Margarida Fonseca (Universidade de Guarulhos, São Paulo), Dra. Rosely Ana Piccolo Grandi (Instituto de Botânica), Dra. Iracema Helena Schoenlein Crusius (Instituto de Botânica).
Diversidade do gênero Ganoderma Karst. (Ganodermataceae) e atividade enzimática de espécies que ocorrem em leguminosas no Brasil e na Colômbia
ABSTRACT
Species of the Ganoderma Karst. (Polyporales) have cosmopolitan distribution. 22 species have been already recorded for the American tropics. Ganoderma species occurs in conifers and in hardwoods of angiosperms, where they can behave as saprophytes or parasites. In leguminous trees in urban arborization species of Ganoderma are phytopathogenic and they may kill their hosts and fall on vehicles and people. Ganoderma species were collected in the cities of São Paulo and Uberlândia in Brazil and Cali and Palmira in Colombia. To contribute to the Ganoderma taxonomy and to obtain preliminary data to future desease control in leguminosae from urban areas this study was performed. In this study, the species of the genus Ganoderma that commonly occur in the legume family were identified by using the morphology of the basidiome, microstructures and ultrastructure of basidiospores, molecular biology, enzymatic profile, thus providing subsidies to taxonomy and future control. In leguminous trees in urban arborization in São Paulo, as parasite, the non-lacquered species G. gibbosum is the most frequent and it has not been cited in Brazil earlier; lacquered species, G. multiplicatum and G. subamboinense have already been cited in Brazil. In Cali, Colombia, species G. gibbosum, G. multiplicatum have been found, an undetermined species, and G. parvulum complex species, which are the most frequent. G. multiplicatum has been cited for the first time in Colombia. In protected areas such as Parque Estadual da Cantareira (São Paulo, SP) G. gibbosum and G.australe have been found on fallen logs, and in Parque Estadual das Fontes do Ipiranga (São Paulo, SP) G. australe and G. multiplicatum have been found and they have already been cited in that park and in several sites in Brazil. The ultrastructure of the basidiospore wall has shown four ornamentation patterns. Related to the production of ligninolytic enzymes, out of the twelve strains evaluated in two culture media: A) sawdust+ water and B) sawdust+ ME (malt extract), only ten grew up. Saprophyte and parasite strains showed ligninolytic enzymatic activity of phenoloxidases and laccases, with predominance of laccase in the two culture media tried. The parasite strains presented higher enzymatic activity at the substrate sawdust moistened with malt extract. MnP production was only confirmed for a strain from the complex G. parvulum, but molecular analysis showed that the individuals tested have the MnP gene. There are differences between parasite species and saprobes concerning the growth rate in the culture media, being slower when the fungus grows in dead trees. There are also differences among enzymatic activities (less quantity of phenoloxidases and laccases when the fungus grows in dead trees). Lignin peroxidase was not detected. One hundred and twenty nine sequences of Ganoderma species from the Neotropics were produced and included in the database GenBank, and thirteen sequences of manganese peroxidase gene were deposited for the first time in this database.
Keywords: Molecular biology, Polyporales, ultrastructure from the basidiospores, laccase, manganês peroxidase, leguminous, Neotropics
RESUMO
Espécies do gênero Ganoderma Karst. (Polyporales) têm distribuição cosmopolita. Para a região tropical americana há registro de 22 espécies. Ganoderma ocorre em coníferas e angiospermas, onde comportam-se como saprófitas ou como parasitas. Em árvores leguminosas de arborização urbana espécies de Ganoderma são fitopatogênicas e provocam a morte de seu hospedeiro e a queda sobre veículos e pessoas. Visando contribuir para a taxonomia do gênero Ganoderma e obter informações preliminares que subsidiem futuro controle de doença em leguminosas utilizadas em arborização urbana foi realizado este trabalho. Neste estudo coletas foram realizadas nas cidades de São Paulo e Uberlândia no Brasil e Cali e Palmira na Colômbia e as espécies do gênero Ganoderma de ocorrência na família leguminosa foram identificadas utilizando a morfologia dos basidiomas, microestruturas, ultraestrutura de basidiósporos, biologia molecular e perfil enzimático. Em árvores leguminosas da arborização urbana na cidade de São Paulo, como parasitas, ocorre a espécie não lacada G. gibbosum (mais freqüente), não citada anteriormente para o Brasil, e as espécies lacadas G. multiplicatum e G. subamboinense, já citadas anteriormente para o Brasil. Para Ubêrlandia foi encontrado G. Gibbosum. Em Cali, na Colombia, foram encontradas as espécies G. gibbosum, G. multiplicatum, uma espécie indeterminada e o complexo de espécies G. parvulum, sendo as espécies deste complexo as mais frequentes. G. multiplicatum é citada pela primeira vez para a Colômbia. Em áreas protegidas, sobre troncos mortos, no Parque Estadual da Cantareira (São Paulo, SP) foram encontradas G. gibbosum e G. australe e no Parque Estadual das Fontes de Ipiranga (São Paulo, SP) G. australe e G. multiplicatum, já citado para Parque e para vários locais do Brasil. A ultraestrutura do basidiósporo das espécies revelou quatro padrões de ornamentação da parede. A produção de enzimas ligninolíticas foi avaliada em treze linhagens, em dois meios de cultura 1) serragem + água e 2) serragem + ME (extrato de malte). Linhagens saprófitas e parasitas apresentaram atividade enzimática ligninolítica de fenoloxidases e lacases, com predomínio de lacase nos dois meios de cultura testados. As linhagens parasitas apresentaram maior atividade enzimática no substrato serragem acrescida de extrato de malte. Produção de manganês peroxidase (MnP) só foi constatado para uma linhagem do complexo G. parvulum, mas análise molecular monstrou que os indivíduos testados possuem o gene da MnP. Há diferenças entre espécimes parasitas e sapróbias quanto a velocidade de crescimento em meio de cultura e atividade enzimática. As espécies saprófitas crescem mais lentamente e presentam menor atividade de fenoloxidases e lacases. Lignina peroxidase não foi detetada. Cento e vinte e nove sequências de espécies de Ganoderma do neotrópico produzidas neste trabalho foram inclusas na base de dados do GenBank e treze sequências do gene de Manganês peroxidase constituem as primeiras referências.
Palavras-chave: Biologia Molecular, Polyporales, Ultraestrutura do basidiósporo, lacase, manganês peroxidase, Leguminosae, Neotrópico
Ana Cristina Bolaños Rojas
Diversidade do gênero Ganoderma Karst. (Ganodermataceae) e atividade enzimática de espécies que
ocorrem em leguminosas no Brasil e na Colômbia
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