{"id":825,"date":"2013-09-17T14:54:24","date_gmt":"2013-09-17T17:54:24","guid":{"rendered":"https:\/\/www.infraestruturameioambiente.sp.gov.br\/pgibt\/?page_id=825"},"modified":"2013-09-17T14:54:24","modified_gmt":"2013-09-17T17:54:24","slug":"2007-amanda-francine-asega","status":"publish","type":"page","link":"https:\/\/www.infraestruturameioambiente.sp.gov.br\/pgibt\/dissertacoesteses\/2007-amanda-francine-asega\/","title":{"rendered":"Amanda Francine Asega DR"},"content":{"rendered":"

\"faixapos6\"<\/a><\/h2>\n
\n

Amanda Francine Asega<\/h2>\n
\n

Amanda Francine Asega, aluna do Programa de P\u00f3s-Gradua\u00e7\u00e3o em Biodiversidade Vegetal e Meio Ambiente do Instituto de Bot\u00e2nica de S\u00e3o Paulo, defendeu,
\nno dia 23 de fevereiro de 2007, sua tese de doutorado intitulada:
\n“Mobiliza\u00e7\u00e3o de frutanos durante a brota\u00e7\u00e3o em\u00a0Vernonia herbacea <\/em>(Vell.) Rusby:
\npurifica\u00e7\u00e3o e express\u00e3o g\u00eanica de\u00a0frutano-exohidrolases\u00a0“.<\/p>\n

A banca examinadora foi composta pela sua orientadora Dra. Maria \u00c2ngela M. de Carvalho (IBt), Dra. S\u00f4nia Machado C. Dietrich (IBt),
\nDra. Mar\u00edlia Gaspar Mais (IBt), Dra. Beatriz Rosana Cordenunsi e \u00a0pela Dra. Rosemeire Aparecida Bom Pessoni.<\/p>\n

\"\"<\/a><\/h2>\n
\n

A mobiliza\u00e7\u00e3o de frutanos durante a brota\u00e7\u00e3o em\u00a0Vernonia herbacea <\/em>(Vell.) Rusby:
\npurifica\u00e7\u00e3o e express\u00e3o g\u00eanica de\u00a0frutano-exohidrolases<\/strong><\/h3>\n
\n

RESUMO<\/strong><\/h4>\n

Vernonia herbacea<\/em>\u00a0(Vell.) Rusby \u00e9 uma esp\u00e9cie nativa do cerrado que apresenta crescimento sazonal e \u00f3rg\u00e3os subterr\u00e2neos denominados riz\u00f3foros, que acumulam altas concentra\u00e7\u00f5es de frutanos do tipo inulina. A enzima respons\u00e1vel pela despolimeriza\u00e7\u00e3o de frutanos \u00e9 a 1-FEH. A atividade mais elevada desta enzima \u00e9 detectada principalmente em riz\u00f3foros de plantas em brota\u00e7\u00e3o natural e de plantas induzidas \u00e0 brota\u00e7\u00e3o pela excis\u00e3o dos \u00f3rg\u00e3os a\u00e9reos. Esta atividade de 1-FEH pode ser ainda intensificada pelo armazenamento no frio das plantas induzidas \u00e0 brota\u00e7\u00e3o. O presente trabalho teve como objetivo estudar a mobiliza\u00e7\u00e3o de frutanos pela a\u00e7\u00e3o da FEH durante o processo de brota\u00e7\u00e3o. A metodologia utilizada para purificar esta enzima consistiu de precipita\u00e7\u00e3o com sulfato de am\u00f4nio, cromatografia de afinidade em coluna ConA e cromatografia de troca i\u00f4nica e resultou na separa\u00e7\u00e3o de diversas fra\u00e7\u00f5es com atividade de 1-FEH e no isolamento de uma invertase com massa molecular de 60 kDa estimada por SDS-PAGE. As fra\u00e7\u00f5es obtidas de plantas em fase de brota\u00e7\u00e3o natural apresentaram um comportamento diferente em coluna de troca ani\u00f4nica quando comparado com o das fra\u00e7\u00f5es obtidas de plantas induzidas \u00e0 brota\u00e7\u00e3o e armazenadas no frio, indicando a presen\u00e7a de diferentes isoformas de 1-FEH em ambas as prepara\u00e7\u00f5es.
\nOs resultados obtidos sugeriram que durante o processo de brota\u00e7\u00e3o, natural ou induzido, a mobiliza\u00e7\u00e3o de frutanos ocorre por um conjunto de prote\u00ednas com atividade hidrol\u00edtica que diferem na sua estrutura f\u00edsica e qu\u00edmica. Durante este trabalho foram clonadas duas seq\u00fc\u00eancias distintas de FEH obtidas de plantas em fase de brota\u00e7\u00e3o, 1-FEH Natural, e de plantas induzidas \u00e0 brota\u00e7\u00e3o e armazenadas a 5\u00b0C, 1-FEH Induzida\/5 \u00b0C. As seq\u00fc\u00eancias foram obtidas por PCR e iPCR, utilizando oligonucleot\u00eddeos degenerados e espec\u00edficos, respectivamente. O seq\u00fc\u00eancia parcial do cDNA da 1-FEH Natural apresentou alta identidade com invertase e com as FEHs de outras esp\u00e9cies, enquanto o cDNA da 1-FEH Induzida\/5\u00b0C apresentou alta identidade somente com outras FEHs, peso molecular de 65,7 kDa e o pI de 5,32 e algumas modifica\u00e7\u00f5es p\u00f3s-traducionais. Este \u00faltimo cDNA foi eficientemente expresso em Pichia pastoris e a prote\u00edna recombinante apresentou atividade de 1-FEH.
\nA atividade e a express\u00e3o g\u00eanica da FEH e o conte\u00fado e a composi\u00e7\u00e3o de frutanos foram analisados em plantas em fase de brota\u00e7\u00e3o natural e em plantas induzidas \u00e0 brota\u00e7\u00e3o (Induzidas). Foi avaliado tamb\u00e9m o efeito da baixa temperatura em plantas induzidas \u00e0 brota\u00e7\u00e3o pela excis\u00e3o dos ramos a\u00e9reos (Induzidas\/5\u00b0C). A atividade da FEH, os conte\u00fados de prote\u00edna e frutanos foram determinados por colorimetria, a composi\u00e7\u00e3o dos frutanos por HPAEC\/PAD e a an\u00e1lise da express\u00e3o g\u00eanica por Northern blotting. As varia\u00e7\u00f5es no conte\u00fado e na composi\u00e7\u00e3o de frutanos, na atividade e na express\u00e3o g\u00eanica de FEH foram detectadas mais significativamente na regi\u00e3o proximal dos riz\u00f3foros de plantas em fase de brota\u00e7\u00e3o natural. A baixa temperatura promoveu o ac\u00famulo de frutanos de baixo GP e intensificou a atividade e a express\u00e3o g\u00eanica da FEH em plantas induzidas \u00e0 brota\u00e7\u00e3o.
\nOs resultados sugerem que no processo de brota\u00e7\u00e3o natural ocorre uma 1-FEH que hidrolisa fruto-polissacr\u00eddeos e _oligossacar\u00eddeos indistintamente enquanto no processo de brota\u00e7\u00e3o induzida ocorre outra 1-FEH com atividade e express\u00e3o g\u00eanica intensificadas pelo frio que hidrolisa preferencialmente fruto-polissacar\u00eddeos para fornecer energia para o restabelecimento dos \u00f3rg\u00e3os a\u00e9reos em plantas Induzidas e para a manuten\u00e7\u00e3o dos n\u00edveis de fruto-oligossacar\u00eddeos em plantas Induzidas\/5 \u00b0C.<\/p>\n

\"\"<\/a><\/p>\n

\n

\"pdf_grande\"<\/a>Amanda Francine Asega
\nA mobiliza\u00e7\u00e3o de frutanos durante a brota\u00e7\u00e3o em\u00a0Vernonia herbacea <\/em>(Vell.) Rusby:
\npurifica\u00e7\u00e3o e express\u00e3o g\u00eanica de\u00a0frutano-exohidrolases<\/a><\/p>\n

\n

\u00a0VOLTAR AS DISSERTA\u00c7\u00d5ES E TESES<\/a><\/strong><\/p>\n

\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"

Amanda Francine Asega Amanda Francine Asega, aluna do Programa de P\u00f3s-Gradua\u00e7\u00e3o em Biodiversidade Vegetal e Meio Ambiente do Instituto de Bot\u00e2nica de S\u00e3o Paulo, defendeu, no dia 23 de fevereiro de 2007, sua tese de doutorado intitulada: “Mobiliza\u00e7\u00e3o de frutanos durante a brota\u00e7\u00e3o em\u00a0Vernonia herbacea (Vell.) Rusby: purifica\u00e7\u00e3o e express\u00e3o g\u00eanica de\u00a0frutano-exohidrolases\u00a0“. A banca examinadora […]<\/p>\n","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"parent":249,"menu_order":0,"comment_status":"closed","ping_status":"open","template":"fullpage.php","meta":[],"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/www.infraestruturameioambiente.sp.gov.br\/pgibt\/wp-json\/wp\/v2\/pages\/825"}],"collection":[{"href":"https:\/\/www.infraestruturameioambiente.sp.gov.br\/pgibt\/wp-json\/wp\/v2\/pages"}],"about":[{"href":"https:\/\/www.infraestruturameioambiente.sp.gov.br\/pgibt\/wp-json\/wp\/v2\/types\/page"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.infraestruturameioambiente.sp.gov.br\/pgibt\/wp-json\/wp\/v2\/users\/1"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.infraestruturameioambiente.sp.gov.br\/pgibt\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=825"}],"version-history":[{"count":0,"href":"https:\/\/www.infraestruturameioambiente.sp.gov.br\/pgibt\/wp-json\/wp\/v2\/pages\/825\/revisions"}],"up":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.infraestruturameioambiente.sp.gov.br\/pgibt\/wp-json\/wp\/v2\/pages\/249"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/www.infraestruturameioambiente.sp.gov.br\/pgibt\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=825"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}