{"id":4328,"date":"2015-02-06T11:39:19","date_gmt":"2015-02-06T13:39:19","guid":{"rendered":"https:\/\/www.infraestruturameioambiente.sp.gov.br\/pgibt\/?page_id=4328"},"modified":"2015-02-06T11:39:19","modified_gmt":"2015-02-06T13:39:19","slug":"2014-angelica-nunes-garcia","status":"publish","type":"page","link":"https:\/\/www.infraestruturameioambiente.sp.gov.br\/pgibt\/dissertacoesteses\/2014-angelica-nunes-garcia\/","title":{"rendered":"Angelica Nunes Garcia MS"},"content":{"rendered":"

\"faixapos6\"<\/a><\/h2>\n
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Angelica Nunes Garcia<\/span><\/h2>\n
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No dia 30 de abril de 2014, a aluna do Programa de P\u00f3s-Gradua\u00e7\u00e3o em Biodiversidade Vegetal e Meio Ambiente do Instituto de Bot\u00e2nica (IBt),
\nAngelica Nunes Garcia (Bolsista CAPES), defendeu sua disserta\u00e7\u00e3o de mestrado intitulada
\n\u201cEstudo qu\u00edmico e de toxicidade subcr\u00f4nica da cianobact\u00e9ria Pseudanabaena galeata<\/em>\u201d.<\/p>\n

O trabalho foi orientado pela Dra. Luciana Retz de Carvalho, do N\u00facleo de Pesquisa em Ficologia do Instituto de Bot\u00e2nica.<\/p>\n

A banca examinadora foi composta pela Dra. Luciana Retz de Carvalho,
\nDra. Luciana Castro da Cunha (FMU) e Dra. Luce Maria Brand\u00e3o Torres (IBt).<\/p>\n

Pseudanabaena\u00a0galeata<\/em>\u00a0CCIBt3082\u00a0coletada no lago do IAG, situado no Parque Estadual\u00a0das\u00a0Fontes\u00a0do Ipiranga (PEFI),\u00a0em S\u00e3o\u00a0Paulo, Brasil era produtora de cianotoxina letal desconhecida. Para avaliar seu potencial risco para mam\u00edferos, associado \u00e0 exposi\u00e7\u00e3o oral, esta cepa \u2013 que havia sido mantida em cultura desde 1996 \u2013 foi submetida a estudos toxicol\u00f3gicos in vitro e in vivo.\u00a0Os resultados mostraram diminui\u00e7\u00e3o\/perda da atividade t\u00f3xica.\u00a0A toxicidade do princ\u00edpio ativo de P.\u00a0galeata <\/em>diminuiu no decorrer do tempo, pois a dose letal aguda m\u00e9dia para camundongos cresceu de 1.000\u00a0mg kg-1 <\/sup>p.c. para 5.000 mg kg-1<\/sup>. No teste subcr\u00f4nico oral (per\u00edodo de 28 dias) n\u00e3o houve varia\u00e7\u00e3o no peso dos animais e dos seus \u00f3rg\u00e3os (f\u00edgado, rins, ba\u00e7o e timo) e, nos correspondentes estudos post-mortem, n\u00e3o foram observadas macro e micro les\u00f5es nos \u00f3rg\u00e3os, com exce\u00e7\u00e3o de dilata\u00e7\u00f5es c\u00edsticas no topo das vilosidades no intestino, devidas possivelmente a dilata\u00e7\u00f5es de vasos linf\u00e1ticos. Essas altera\u00e7\u00f5es podem ser atribu\u00eddas a um leve processo inflamat\u00f3rio, na regi\u00e3o. Nossos resultados s\u00e3o distintos dos encontrados na literatura, que descrevem P. galeata<\/em> como produtora de potente toxina. A perda de caracter\u00edsticas morfol\u00f3gicas e bioqu\u00edmicas, que t\u00eam sido frequentemente observadas em cianobact\u00e9rias e bact\u00e9rias mantidas em cultura, s\u00e3o associadas, atualmente, a varia\u00e7\u00f5es no tamanho de seu genoma, pois a evolu\u00e7\u00e3o de um micro-organismo \u00e9, na maioria das vezes, condicionado por seu estilo de vida. Esses processos adaptativos podem levar \u00e0 perda de genes acess\u00f3rios e consequentemente a mudan\u00e7as morfol\u00f3gicas e bioqu\u00edmicas.<\/p>\n

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Estudo qu\u00edmico e de toxicidade subcr\u00f4nica da cianobact\u00e9ria\u00a0Pseudanabaena galeata<\/em><\/h3>\n
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RESUMO<\/strong><\/h4>\n

As cianobact\u00e9rias s\u00e3o organismos procariontes fotossintetizantes, com grande import\u00e2ncia ecol\u00f3gica, integrantes do fitopl\u00e2ncton dos corpos de \u00e1guas doces e salgadas, em todo o mundo. Uma de suas caracter\u00edsticas mais importantes \u00e9 a produ\u00e7\u00e3o de metabolitos t\u00f3xicos, as cianotoxinas, cuja presen\u00e7a em reservat\u00f3rios de abastecimento, em \u00e1gua utilizada em processos de di\u00e1lise e ainda acumuladas em gl\u00e2ndulas e tecidos de mariscos e peixes foi respons\u00e1vel por in\u00fameros casos de intoxica\u00e7\u00e3o e de morte de seres humanos e de animais. O N\u00facleo de Pesquisa em Ficologia do Instituto de Bot\u00e2nica dedica-se ao estudo de v\u00e1rios aspectos destes organismos, sendo um deles a avalia\u00e7\u00e3o das atividades biol\u00f3gicas dos extratos das cianobact\u00e9rias que comp\u00f5em a Cole\u00e7\u00e3o de Cultura de Cianobact\u00e9rias do Instituto de Bot\u00e2nica. Nessas pesquisas, foram encontradas cepas causadoras de efeitos t\u00f3xicos importantes: Pseudanabaena galeata <\/em>(CCIBt 3082), que est\u00e1 entre essas linhagens t\u00f3xicas, foi escolhida para investiga\u00e7\u00e3o toxicol\u00f3gica e qu\u00edmica, devido aos efeitos nocivos que pode acarretar a animais, por administra\u00e7\u00e3o oral e intraperitoneal. Tendo-se em conta o risco que a(s) subst\u00e2ncia(s) ativa(s) presente(s) em P. galeata<\/em> pode(m) representar e \u00e0 inexist\u00eancia de conhecimentos sobre seus efeitos t\u00f3xicos, produzidos pela exposi\u00e7\u00e3o prolongada sobre mam\u00edferos, nossa proposta consistiu na caracteriza\u00e7\u00e3o qu\u00edmica e toxicol\u00f3gica (exposi\u00e7\u00e3o prolongada, administra\u00e7\u00e3o por via oral) da fra\u00e7\u00e3o ativa do extrato da cepa Pseudanabaena galeata<\/em> CCIBt 3082 <\/i>(Cyanobacteria, Pseudanabaenales). Para tanto, a cepa Pseudanabaena galeata<\/em> CCIBt 3082, <\/i>coletada no Parque Estadual das Fontes do Ipiranga, em S\u00e3o Paulo, no dia 01\/11\/1996 e mantida na Cole\u00e7\u00e3o de Culturas de Cianobact\u00e9rias do N\u00facleo de Pesquisas em Ficologia do Instituto de Bot\u00e2nica de S\u00e3o Paulo, foi cultivada, em dois \u201cbatches\u201d distintos, sob condi\u00e7\u00f5es controladas de temperatura e irradi\u00e2ncia. Cada uma a sua vez, as biomassas, obtidas na fase exponencial de crescimento da cepa, foram liofilizadas, pesadas, submetidas \u00e0 extra\u00e7\u00e3o com \u00e1cido ac\u00e9tico 0,1 M, por exposi\u00e7\u00e3o a ultrassom, seguida por centrifuga\u00e7\u00e3o. Os sobrenadantes foram reunidos, liofilizados e pesados. A biomassa resultante do processamento do primeiro \u201cbatch\u201d foi empregada no ensaio preliminar de toxicidade em camundongos, por via oral, dose \u00fanica e no ensaio de toxicidade subcr\u00f4nica, 28 dias. A biomassa resultante do segundo \u201cbatch\u201d foi divida em duas por\u00e7\u00f5es. Com a primeira delas foram realizados os seguintes estudos qu\u00edmicos: teste cromatogr\u00e1fico, por Cromatografia Planar, para detec\u00e7\u00e3o de microcistinas, saxitoxinas, antoxina-a e \u03b2-metilaminoalanina; fracionamento e refracionamento do extrato <\/b>em \u00e1cido ac\u00e9tico 0,1 M; an\u00e1lise do extrato, da Fra\u00e7\u00e3o 1<\/b> e da subfra\u00e7\u00e3o 1.a,<\/b> por Cromatografia L\u00edquida de Alta Efici\u00eancia e an\u00e1lise do mesmo extrato e da subfra\u00e7\u00e3o 1.a<\/b>, por Cromatografia Planar, para pesquisa de amino\u00e1cidos, aminas, alcaloides, pept\u00eddeos e terpenoides. Com a outra por\u00e7\u00e3o, foram realizados estudos biol\u00f3gicos \u201cin vitro\u201d e \u201cin vivo\u201d. Os estudos \u201cin vitro\u201d consistiram em ensaios bioautogr\u00e1ficos para an\u00e1lise do potencial antif\u00fangico, das atividades antioxidante e da inibidora da enzima aceticolinesterase. Os estudos \u201cin vivo\u201d consistiram dos ensaios, em camundongo, 1) da toxicidade aguda (dose \u00fanica), por via intraperitoneal e 2) da toxicidade oral aguda (DL50<\/sub>) e 3) da toxicidade subcr\u00f4nica, 28 dias. O extrato obtido do primeiro \u201cbatch\u201d, no ensaio preliminar de toxicidade em camundongos, por via oral, dose \u00fanica, causou sinais de intoxica\u00e7\u00e3o e les\u00f5es no f\u00edgado e rins dos animais; no ensaio de toxicidade subcr\u00f4nica 28 dias, efetuado com doses muito baixas (1, 5 e 25 mg kg-1<\/sup>), os animais apresentaram apenas tend\u00eancia de perda de peso. No extrato obtido do segundo \u201cbatch\u201d n\u00e3o foram detectadas, por Cromatografia Planar, microcistinas, saxitoxinas, anatoxina-a ou \u03b2-metilaminoalanina. O fracionamento e refracionamento do extrato em \u00e1cido ac\u00e9tico (em cartucho de s\u00edlica octadecilsilanizada) resultaram no isolamento de subst\u00e2ncia com natureza pept\u00eddica. Os estudos biol\u00f3gicos \u201cin vitro\u201d apresentaram resultados negativos para a presen\u00e7a de subst\u00e2ncias com atividade antif\u00fangica, anticolinester\u00e1sica e antioxidante. J\u00e1 nos estudos biol\u00f3gicos \u201cin vivo\u201d, no ensaio de toxicidade aguda (dose \u00fanica), por via intraperitoneal, o extrato causou congest\u00e3o hep\u00e1tica; a (DL50<\/sub>), por via oral foi de <\/b>5.000 mg kg-1<\/sup>, e no exame \u201cpost-mortem\u201d foi observado f\u00edgado congesto. No ensaio de toxicidade subcr\u00f4nica, os animais apresentaram tend\u00eancia de perda de peso e nos estudos histopatol\u00f3gicos do intestino, dilata\u00e7\u00e3o c\u00edstica no topo das vilosidades, devido \u00e0 dilata\u00e7\u00e3o dos vasos linf\u00e1ticos. A compara\u00e7\u00e3o entre as doses \u00fanicas, por via oral, que levaram os animais a \u00f3bito, relativas aos experimentos realizados com biomassa do primeiro e do segundo \u201cbatch\u201d (1.000 mg kg-1<\/sup>\u2013 5.000 mg kg-1<\/sup>) mostra disparidade entre os efeitos t\u00f3xicos de ambos. Levando-se em conta que logo ap\u00f3s o cultivo do segundo \u201cbatch\u201d, a amostra da cepa P. galeata <\/em>CCIBt 3082 entrou em senesc\u00eancia e em lise, essas observa\u00e7\u00f5es indicam mudan\u00e7as bioqu\u00edmicas na linhagem, quadro j\u00e1 descrito para outros organismos, na literatura.<\/p>\n

Palavras-chave:<\/strong> Cyanobacteria, toxicidade aguda, mudan\u00e7as em cultivo.<\/p>\n

\n

\"pdf_grande\"<\/a>Angelica Nunes Garcia
\nEstudo qu\u00edmico e de toxicidade subcr\u00f4nica da cianobact\u00e9ria\u00a0Pseudanabaena galeata<\/em>
\n<\/a><\/p>\n

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\u00a0VOLTAR AS DISSERTA\u00c7\u00d5ES E TESES<\/a><\/strong><\/p>\n

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Angelica Nunes Garcia No dia 30 de abril de 2014, a aluna do Programa de P\u00f3s-Gradua\u00e7\u00e3o em Biodiversidade Vegetal e Meio Ambiente do Instituto de Bot\u00e2nica (IBt), Angelica Nunes Garcia (Bolsista CAPES), defendeu sua disserta\u00e7\u00e3o de mestrado intitulada \u201cEstudo qu\u00edmico e de toxicidade subcr\u00f4nica da cianobact\u00e9ria Pseudanabaena galeata\u201d. O trabalho foi orientado pela Dra. Luciana […]<\/p>\n","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"parent":249,"menu_order":0,"comment_status":"closed","ping_status":"open","template":"fullpage.php","meta":[],"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/www.infraestruturameioambiente.sp.gov.br\/pgibt\/wp-json\/wp\/v2\/pages\/4328"}],"collection":[{"href":"https:\/\/www.infraestruturameioambiente.sp.gov.br\/pgibt\/wp-json\/wp\/v2\/pages"}],"about":[{"href":"https:\/\/www.infraestruturameioambiente.sp.gov.br\/pgibt\/wp-json\/wp\/v2\/types\/page"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.infraestruturameioambiente.sp.gov.br\/pgibt\/wp-json\/wp\/v2\/users\/1"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.infraestruturameioambiente.sp.gov.br\/pgibt\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=4328"}],"version-history":[{"count":0,"href":"https:\/\/www.infraestruturameioambiente.sp.gov.br\/pgibt\/wp-json\/wp\/v2\/pages\/4328\/revisions"}],"up":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.infraestruturameioambiente.sp.gov.br\/pgibt\/wp-json\/wp\/v2\/pages\/249"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/www.infraestruturameioambiente.sp.gov.br\/pgibt\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=4328"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}