{"id":4294,"date":"2015-02-05T18:55:29","date_gmt":"2015-02-05T20:55:29","guid":{"rendered":"https:\/\/www.infraestruturameioambiente.sp.gov.br\/pgibt\/?page_id=4294"},"modified":"2015-02-05T18:55:29","modified_gmt":"2015-02-05T20:55:29","slug":"2014-levi-pompermayer-machado","status":"publish","type":"page","link":"https:\/\/www.infraestruturameioambiente.sp.gov.br\/pgibt\/dissertacoesteses\/2014-levi-pompermayer-machado\/","title":{"rendered":"Levi Pompermayer Machado DR"},"content":{"rendered":"<h2 style=\"text-align: center\"><a href=\"https:\/\/smastr16.blob.core.windows.net\/pgibt\/2015\/02\/faixapos6.jpg\"><img decoding=\"async\" loading=\"lazy\" class=\"aligncenter size-full wp-image-3777\" style=\"border: 0px\" alt=\"faixapos6\" src=\"https:\/\/smastr16.blob.core.windows.net\/pgibt\/2015\/02\/faixapos6.jpg\" width=\"950\" height=\"163\" srcset=\"https:\/\/smastr16.blob.core.windows.net\/pgibt\/2015\/02\/faixapos6.jpg 950w, https:\/\/smastr16.blob.core.windows.net\/pgibt\/2015\/02\/faixapos6-768x131.jpg 768w\" sizes=\"(max-width: 950px) 100vw, 950px\" \/><\/a><\/h2>\n<hr align=\"center\" noshade=\"noshade\" size=\"1\" width=\"100%\" \/>\n<h2 style=\"text-align: center\"><span style=\"color: #003300\"><b>Levi Pompermayer Machado<\/b><\/span><\/h2>\n<hr align=\"center\" noshade=\"noshade\" size=\"1\" width=\"100%\" \/>\n<p align=\"center\">O aluno Levi Pompermayer Machado obteve o T\u00edtulo de Doutor pelo Programa de P\u00f3s-Gradua\u00e7\u00e3o em Biodiversidade Vegetal e<br \/>\nMeio Ambiente do Instituto de Bot\u00e2nica de S\u00e3o Paulo (IBt\/SP),\u00a0em 29 de julho de 2014. Sua tese, intitulada:<br \/>\nDetermina\u00e7\u00e3o dos metabolitos com atividade antif\u00fangica e cultivo em biorreatores para obten\u00e7\u00e3o de bioativos de <i>Ochtodes secundiramea<\/i> e<br \/>\nde linhagens pigmentares de <i>Hypnea musciformis <\/i>( Rhodophyta)<\/p>\n<p><img decoding=\"async\" loading=\"lazy\" class=\"aligncenter size-full wp-image-4295\" alt=\"Levi_Machado\" src=\"https:\/\/smastr16.blob.core.windows.net\/pgibt\/2015\/02\/Levi_Machado.jpg\" width=\"384\" height=\"260\" \/><\/p>\n<p align=\"center\">contou com a orienta\u00e7\u00e3o da Dra. Nair Sumie Yokoya (IBt\/SP) e com a co-orienta\u00e7\u00e3o do Dr. Pio Colepicolo (USP).<br \/>\nA tese foi avaliada pela banca examinadora composta pela: Prof. Dra. Yocie Yoneshigue Valentin (UFRJ), Prof. Dra. Hosana Maria Debonsi (USP),<br \/>\nProf. Dr. <em>Ernani Pinto<\/em> (USP) e pelo Prof. Dr. Danilo da Cruz Centeno (UFabc).<\/p>\n<p align=\"center\">O projeto se prop\u00f4s a determinar para <em>Ochtodes secundiramea <\/em>e das linhagens pigmentares de<br \/>\n<em>H. musciformis<\/em> os metabolitos com atividade antif\u00fangica para o controle de fungos fitopatog\u00eanicos causadores da antracnose.<br \/>\nAp\u00f3s a determina\u00e7\u00e3o das mol\u00e9culas foi realizado o cultivo das macroalgas em biorreatores objetivando aumento no rendimento para a obten\u00e7\u00e3o dos bioativos.<i><\/i><\/p>\n<hr align=\"center\" noshade=\"noshade\" size=\"1\" width=\"100%\" \/>\n<h3 style=\"text-align: center\"><b>Determina\u00e7\u00e3o dos metabolitos com atividade antif\u00fangica e cultivo em biorreatores para obten\u00e7\u00e3o de bioativos de <em>Ochtodes secundiramea <\/em>e de linhagens pigmentares de <em>Hypnea musciformis <\/em>( Rhodophyta)\u00a0<\/b><\/h3>\n<hr align=\"center\" noshade=\"noshade\" size=\"1\" width=\"100%\" \/>\n<h4 style=\"text-align: center\"><strong>RESUMO<\/strong><\/h4>\n<p style=\"text-align: justify\">A macroalga <em>Ochtodes secundiramea<\/em> (Montagne) M.A. Howe (Rhodophyta, Gigartinales) e as linhagens pigmentares de <em>Hypnea musciformis <\/em>(Wulfen) J.V. Lamouroux (Rhodophyta, Gigartinales) apresentam expressivo potencial biotecnol\u00f3gico, principalmente no que se refere \u00e0 aplica\u00e7\u00e3o de seus extratos (ricos em monoterpenos halogenados e ester\u00f3is, \u00e1cidos graxos e glicer\u00f3is, respectivamente) na inibi\u00e7\u00e3o do crescimento de fungos do g\u00eanero <em>Colletotrichum<\/em>. Esses fungos fitopat\u00f3genos causam antracnose em frutas e por isso, promovem perdas significativas ao agroneg\u00f3cio. Para isso, os objetivos do presente estudo foram: (1) realizar o fracionamento bioguiado e determinar as subst\u00e2ncias bioativas dos extratos das linhagens de cor de <em>H. musciformis <\/em>e <em>O. secundiramea<\/em><i>, <\/i>que possuem potencial antif\u00fangico para controle de fungos fitopatog\u00eanicos <i>in vitro <\/i>e<i> in vivo<\/i>, avaliando adicionalmente o efeito do uso de biomassa fresca, liofilizada e seca na bioatividade e composi\u00e7\u00e3o dos extratos; (2) verificar a influ\u00eancia do enriquecimento por\u00a0 CO<sub>2 <\/sub>para as linhagens de <em>H. musciformis<\/em> e de KBr para <em>O. secundiramea<\/em> em cultivos realizados em biorreatores, avaliando a fisiologia das macroalgas e a produ\u00e7\u00e3o dos metabolitos de interesse e (3) Avaliar o efeito, no desenvolvimento da antracnose e no amadurecimento de frutos de mam\u00e3o em resposta a aplica\u00e7\u00e3o de biofilme contendo os bioativos de macroalgas. A utiliza\u00e7\u00e3o da biomassa de alga fresca permitiu maior rendimento na obten\u00e7\u00e3o de extratos das linhagens de <em>H. musciformis<\/em>, e a atividade antif\u00fangica e o perfil em cromatografia gasosa\/espectrometria de massas (CG\/EM) n\u00e3o foi alterado. Est\u00e1 an\u00e1lise revelou que o extrato da linhagem marrom (MA) de <em>H. musciformis<\/em> apresentou uma quantidade menor de subst\u00e2ncias e de manchas bioativas do que a linhagem verde clara (VC) na bioautografia qualitativa. O limite de detec\u00e7\u00e3o (LD) foi 100 \u00b5g para os extratos das duas linhagens, sendo considerada uma fraca atividade antif\u00fangica. Para <i>O. secundiramea<\/i>, n\u00e3o houve diferen\u00e7a no rendimento de extra\u00e7\u00e3o, no entanto, foi observado a forma\u00e7\u00e3o de monoterpenos oxidados nos tratamentos com biomassa liofilizada e seca, associado com o aparecimento de manchas de atividade antif\u00fangica em bioautografia por cromatografia em camada delgada (CCD). Ap\u00f3s o fracionamento bioguiado por CCD preparativa, a an\u00e1lise por cromatografia l\u00edquida de alta efici\u00eancia\/espectrometria de massas de alta resolu\u00e7\u00e3o (CLAE\/EM) revelou a presen\u00e7a de ester\u00f3is-glicosilados, compostos derivados de colesterol associados \u00e0 galacto ou glicopiranosil e \u00e1cidos graxos. An\u00e1lise por CG\/EM do extrato e da fra\u00e7\u00e3o bioativade<em> O. secundiramea <\/em>indicou a presen\u00e7a de diversos monoterpenos halogenados, e ap\u00f3s cromatografia em coluna foram isoladas sub-fra\u00e7\u00f5es e as avalia\u00e7\u00f5es em CG\/EM e resson\u00e2ncia magn\u00e9tica nuclear (RMN) confirmaram a presen\u00e7a dos monoterpenos C<sub>10<\/sub>H<sub>13<\/sub>Br<sub>3<\/sub>Cl\u00a0 e C<sub>10<\/sub>H<sub>15<\/sub>Br<sub>2<\/sub>Cl\u00a0 e indicaram a presen\u00e7a dos terpenos C<sub>10<\/sub>H<sub>12<\/sub>OBr<sub>2<\/sub>, C<sub>10<\/sub>H<sub>14<\/sub>Br<sub>2 <\/sub>e C<sub>10<\/sub>H<sub>14<\/sub>BrCl.\u00a0 Estas sub-fra\u00e7\u00f5es apresentaram o mesmo limite de detec\u00e7\u00e3o (1 \u00b5g) que o extrato da FB<sub>CCD<\/sub>. A aplica\u00e7\u00e3o dos biofilmes de amido contento extrato ou FB<sub>CCD <\/sub>na concentra\u00e7\u00e3o de 10 \u00b5g.mL<sup>-1<\/sup>, valor da concentra\u00e7\u00e3o inibit\u00f3ria m\u00ednima contra o crescimento de <em>Colletotrichum gloeosporioides<\/em> (determinada pelo m\u00e9todo da difus\u00e3o em \u00e1gar), inibiram o desenvolvimento da antracnose p\u00f3s-colheita e n\u00e3o causaram sintomas de toxicidade no fruto, no experimento simulando o per\u00edodo de prateleira do mam\u00e3o. O cultivo em biorreatores com enriquecimento por CO<sub>2 <\/sub>n\u00e3o afetou o crescimento e as concentra\u00e7\u00f5es de pigmentos fotossintetizantes, prote\u00ednas e a\u00e7\u00facares totais das linhagens de <i>H. musciformis<\/i>, no entanto, foi observada a s\u00edntese de diferentes ester\u00f3is-glicosilados relacionados como aparecimento de manchas antif\u00fangicas no extrato da linhagem MA. O enriquecimento do meio com bromo, no cultivo de <em>O. secundiramea<\/em>, causou\u00a0 aumento de 50% na concentra\u00e7\u00e3o e na atividade da enzima bromoperoxidase, o que promoveu aumento equivalente na remo\u00e7\u00e3o do bromo do meio e na sua incorpora\u00e7\u00e3o ao talo da alga. Este tratamento causou tamb\u00e9m aumento nas concentra\u00e7\u00f5es de pigmentos e de prote\u00ednas associadas \u00e0 prote\u00e7\u00e3o, promovida pela enzima, contra estresse oxidativo, e n\u00e3o foram observadas altera\u00e7\u00f5es no perfil dos monoterpenos oxigenados em resposta ao tratamento. Os resultados permitiram de linear as seguintes conclus\u00f5es: (1) os monoterpenos halogenados de <em>O. secundiramea<\/em> apresentaram elevado potencial antif\u00fangico para aplica\u00e7\u00e3o do controle da antracnose; (2) Indica\u00e7\u00e3o da presen\u00e7a de ester\u00f3is &#8211; glicosilados na fra\u00e7\u00e3o bioativa das linhagens de<em> H. musciformis<\/em>, sendo que\u00a0 a linhagem VC apresentou maior diversidade qu\u00edmica e potencial antif\u00fangico do que a linhagem MA; (3) a manipula\u00e7\u00e3o de par\u00e2metros abi\u00f3ticos nos cultivos em biorreatores possibilitaram a obten\u00e7\u00e3o de biomassa e dos metabolitos bioativos das esp\u00e9cies estudadas; e (4) O extrato e a FB<sub>CCD <\/sub>de <em>O. secundiramea<\/em>, aplicados juntamente como biofilme de amido, foram eficazes na inibi\u00e7\u00e3o da antracnose p\u00f3s-colheita do mam\u00e3o, sem causar sintomas de fitotoxicidade.<\/p>\n<p style=\"text-align: justify\"><b>Palavras chaves: <\/b>Monoterpenos halogenados, Ester\u00f3is glicosilados, <em>Ochtodes secundiramea<\/em>, linhagens de <em>Hypena musciformis<\/em>, Fungos fitopat\u00f3genos, Antracnose.<i><\/i><\/p>\n<hr align=\"center\" noshade=\"noshade\" size=\"1\" width=\"100%\" \/>\n<p style=\"text-align: center\"><a href=\"https:\/\/smastr16.blob.core.windows.net\/pgibt\/2013\/09\/pdf_grande.gif\"><img decoding=\"async\" loading=\"lazy\" class=\"aligncenter size-full wp-image-2313\" style=\"border: 0px\" alt=\"pdf_grande\" src=\"https:\/\/smastr16.blob.core.windows.net\/pgibt\/2013\/09\/pdf_grande.gif\" width=\"60\" height=\"60\" \/><\/a><a href=\"https:\/\/smastr16.blob.core.windows.net\/pgibt\/2015\/02\/Levi_Pompemayer_Machado_DR.pdf\" target=\"_blank\">Levi Pompermayer Machado<br \/>\nDetermina\u00e7\u00e3o dos metabolitos com atividade antif\u00fangica e cultivo em biorreatores para<br \/>\nobten\u00e7\u00e3o de bioativos de <em>Ochtodes secundiramea <\/em>e de linhagens pigmentares de <em>Hypnea musciformis<\/em> ( Rhodophyta)\u00a0<\/a><\/p>\n<hr align=\"center\" noshade=\"noshade\" size=\"1\" width=\"100%\" \/>\n<p style=\"text-align: center\"><strong>\u00a0<a href=\"https:\/\/www.infraestruturameioambiente.sp.gov.br\/pgibt\/dissertacoesteses\/\">VOLTAR AS DISSERTA\u00c7\u00d5ES E TESES<\/a><\/strong><\/p>\n<hr align=\"center\" noshade=\"noshade\" size=\"1\" width=\"100%\" \/>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Levi Pompermayer Machado O aluno Levi Pompermayer Machado obteve o T\u00edtulo de Doutor pelo Programa de P\u00f3s-Gradua\u00e7\u00e3o em Biodiversidade Vegetal e Meio Ambiente do Instituto de Bot\u00e2nica de S\u00e3o Paulo (IBt\/SP),\u00a0em 29 de julho de 2014. 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