{"id":1148,"date":"2013-09-19T14:05:20","date_gmt":"2013-09-19T17:05:20","guid":{"rendered":"https:\/\/www.infraestruturameioambiente.sp.gov.br\/pgibt\/?page_id=1148"},"modified":"2013-09-19T14:05:20","modified_gmt":"2013-09-19T17:05:20","slug":"2007-glauciane-danusa-coelho","status":"publish","type":"page","link":"https:\/\/www.infraestruturameioambiente.sp.gov.br\/pgibt\/dissertacoesteses\/2007-glauciane-danusa-coelho\/","title":{"rendered":"Glauciane Danusa Coelho DR"},"content":{"rendered":"

\"faixapos6\"<\/a><\/h2>\n
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Glauciane Danusa Coelho<\/h2>\n
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Glauciane Danusa Coelho, aluna do curso de P\u00f3s- Gradua\u00e7\u00e3o em Biodiversidade Vegetal e Meio Ambiente do Instituto de Bot\u00e2nica, sob a orienta\u00e7\u00e3o da Dra. Marina Capelari (IBt), defendeu em 26 de setembro de 2007 sua Tese de Doutorado, intitulada
\n” Purifica\u00e7\u00e3o parcial do sistema enzim\u00e1tico produzido por\u00a0Psilocybe castanella CCB444<\/em>\u00a0durante crescimento em solo “.<\/p>\n

A banca examinadora foi composta por: Dra. Marina Capelari, (orientadora – IBt), Dr. D\u00e1cio Roberto Matheus (IBt),
\nDra. Iracema Schoenlein-Crusius (IBt), Dra. Adriana Florentino de Souza Leoni (UniSantos) e Dr. Jonas Contiero (externo).<\/p>\n

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Purifica\u00e7\u00e3o parcial do sistema enzim\u00e1tico produzido por
\nPsilocybe castanella <\/em>CCB444\u00a0durante crescimento em solo<\/h3>\n
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RESUMO<\/strong><\/h4>\n

Psilocybe castanella <\/em>CCB444, com capacidade comprovada de mineralizar pentaclorofenol e hexaclorobenzeno, foi avaliado em processo de biorremedia\u00e7\u00e3o de solo contaminado com organoclorados. Este trabalho descreve a identifica\u00e7\u00e3o da principal enzima ligninol\u00edtica, lacase, produzida por este fungo, purifica\u00e7\u00e3o parcial e caracteriza\u00e7\u00e3o, bem como a avalia\u00e7\u00e3o da capacidade dessa enzima em de degradar o pentaclorofenol (PCP) in vitro. Atividade de lacase foi detectada durante crescimento de\u00a0P. castanella<\/em>\u00a0em solo acrescido de gesso, tween 20 e \u00f3leo vegetal, aos 19 dias de cultivo. O extrato enzim\u00e1tico extracelular foi obtido com tamp\u00e3o acetato de s\u00f3dio 50 mM pH 4,5 (1:3 m\/v). Para a purifica\u00e7\u00e3o parcial da lacase foram empregados os processos de precipita\u00e7\u00e3o de prote\u00ednas com 90% de satura\u00e7\u00e3o de sulfato de am\u00f4nio, clarifica\u00e7\u00e3o (PVPP 4%), ultrafiltra\u00e7\u00e3o (10KDa) e cromatografia de exclus\u00e3o molecular (Sephadex G-200). A rea\u00e7\u00e3o de degrada\u00e7\u00e3o do PCP incluiu, a lacase purificada do na concentra\u00e7\u00e3o de 7,5 UL-1, tamp\u00e3o acetato de s\u00f3dio, \u00e1gua e solu\u00e7\u00e3o de PCP dilu\u00eddo em etanol. A mistura de rea\u00e7\u00e3o foi incubada no escuro durante 24h. A quantifica\u00e7\u00e3o do PCP foi determinada por HPLC. A efici\u00eancia da enzima foi avaliada em diferentes concentra\u00e7\u00f5es de PCP, valores de pH e presen\u00e7a de subst\u00e2ncias inibidoras e mediadoras. A massa molecular da enzima foi estimada em 64 KDa, o Km aparente foi de 4,6 mM e a Vmax de 11,16 UL-1. Os valores de temperatura e pH \u00f3timos foram de 50\u00baC e 2,5, respectivamente. A lacase apresentou-se est\u00e1vel a temperatura ambiente, mantendo 96% de atividade ap\u00f3s 24 h de incuba\u00e7\u00e3o. Meia-vidas de 19 h, 17 h e 47 min foram verificadas a 55\u00b0C, 60\u00baC e 80\u00b0C, respectivamente. A atividade enzim\u00e1tica foi inibida totalmente pela adi\u00e7\u00e3o de azida s\u00f3dica e sulfato de ferro II e estimulada pelo sulfato de cobre II e de mangan\u00eas II. As maiores porcentagens de degrada\u00e7\u00e3o do PCP foram obtidas nas concentra\u00e7\u00f5es de 100 e de 150 \u00b5g\/mL de PCP e em pH 3,5. Subst\u00e2ncias como o ABTS e RBBR, conhecidas por serem mediadores de lacase, n\u00e3o favoreceram a degrada\u00e7\u00e3o do PCP, enquanto o cloreto de ferro e o sulfato de ferro inibiram completamente a transforma\u00e7\u00e3o do PCP pela lacase.<\/p>\n

Palavras-chaves:<\/strong>\u00a0purifica\u00e7\u00e3o de lacase, enzima ligninol\u00edtica, basidiomicetos,\u00a0Psilocybe castanella<\/em>, degrada\u00e7\u00e3o in vitro<\/p>\n

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\"pdf_grande\"<\/a>Glauciane Danusa Coelho
\nPurifica\u00e7\u00e3o parcial do sistema enzim\u00e1tico produzido por\u00a0Psilocybe castanella <\/em>CCB444\u00a0durante crescimento em solo.<\/a><\/p>\n

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\u00a0VOLTAR AS DISSERTA\u00c7\u00d5ES E TESES<\/a><\/strong><\/p>\n

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