{"id":1098,"date":"2013-09-18T16:55:00","date_gmt":"2013-09-18T19:55:00","guid":{"rendered":"https:\/\/www.infraestruturameioambiente.sp.gov.br\/pgibt\/?page_id=1098"},"modified":"2013-09-18T16:55:00","modified_gmt":"2013-09-18T19:55:00","slug":"2010-camila-ranzatto-dogo","status":"publish","type":"page","link":"https:\/\/www.infraestruturameioambiente.sp.gov.br\/pgibt\/dissertacoesteses\/2010-camila-ranzatto-dogo\/","title":{"rendered":"Camila Ranzatto Dogo MS"},"content":{"rendered":"

\"faixapos6\"<\/a><\/h2>\n
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Camila Ranzatto Dogo<\/span><\/h2>\n
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No dia 23 de mar\u00e7o de 2010, a aluna do Programa de P\u00f3s-Gradua\u00e7\u00e3o em Biodiversidade Vegetal e Meio Ambiente do Instituto de Bot\u00e2nica de S\u00e3o Paulo, Camila Ranzatto Dogo (Bolsista CAPES), defendeu sua disserta\u00e7\u00e3o de mestrado intitulada<\/p>\n

\u201cCaracteriza\u00e7\u00e3o dos efeitos t\u00f3xicos da fra\u00e7\u00e3o ativa da cepa CCIBt 920\u00a0Geitlerinema<\/em>\u00a0amphibium<\/em>\u00a0(Cyanophyceae, Oscillatoriales)
\nna microcircula\u00e7\u00e3o e em fibras musculares: an\u00e1lise por microscopia intravital\u201d.<\/p>\n

A banca examinadora foi composta pelo Dr. Jo\u00e3o Sarkis Yunes (UFRS), Dra. Luciana Retz de Carvalho (Orientadora\/IBt) e Dra. Carla Lima (IBu). A disserta\u00e7\u00e3o consta de estudos realizados por microscopia intravital, t\u00e9cnica que permite a observa\u00e7\u00e3o “in vivo” da microcircula\u00e7\u00e3o sangu\u00ednea, os quais, aliados \u00e0s an\u00e1lises de migra\u00e7\u00e3o celular e \u00e0 dosagem de citocinas, indicaram que o extrato metan\u00f3lico de\u00a0G. amphibium<\/em>\u00a0possui atividade pr\u00f3-inflamat\u00f3ria. As an\u00e1lises histopatol\u00f3gicas corroboraram as observa\u00e7\u00f5es feitas atrav\u00e9s da microscopia intravital, confirmando que o \u00f3bito dos animais intoxicados por este extrato ocorre devido a danos circulat\u00f3rios. O fracionamento qu\u00edmico desse mesmo extrato, monitorado por microscopia intravital, mostrou que nele existem quatro fra\u00e7\u00f5es com efeito pr\u00f3-inflamat\u00f3rio e que provavelmente h\u00e1 sinergismo entre elas.<\/p>\n

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CARACTERIZA\u00c7\u00c3O DOS EFEITOS T\u00d3XICOS DA FRA\u00c7\u00c3O ATIVA DA CEPA SPC 920 Geitlerinema amphibium<\/em> (CYANOPHYCEAE, OSCILLATORIALES) NA MICROCIRCULA\u00c7\u00c3O E EM FIBRAS MUSCULARES:\u00a0AN\u00c1LISE POR MICROSCOPIA INTRAVITAL.<\/h3>\n
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RESUMO<\/strong><\/h4>\n

Geitlerinema amphibium<\/em>\u00a0\u00e9 uma cianobact\u00e9ria ainda pouco estudada quanto \u00e0 toxicidade, por\u00e9m frequente em reservat\u00f3rios de abastecimento p\u00fablico da Regi\u00e3o Metropolitana de S\u00e3o Paulo (Brasil). Estudos recentes mostram que linhagens desta esp\u00e9cie, provenientes da Represa Guarapiranga (S\u00e3o Paulo – Brasil), apresentam toxicidade, quando testadas pelo teste padr\u00e3o, em camundongo. Entretanto, os sinais apresentados pelos animais intoxicados s\u00e3o distintos daqueles causados pelas cianotoxinas conhecidas at\u00e9 o presente (microcistinas, nodularinas, cilindrospermopsinas, anatoxinas e saxitoxinas), o que sugere a presen\u00e7a de uma nova cianotoxina, cuja natureza qu\u00edmica e efeitos s\u00e3o desconhecidos. Devido \u00e0 freq\u00fc\u00eancia com que\u00a0G. amphibium<\/em>\u00a0\u00e9 encontrada em reservat\u00f3rios de abastecimento p\u00fablico, s\u00e3o imprescind\u00edveis, al\u00e9m do estudo qu\u00edmico da toxina em quest\u00e3o, a avalia\u00e7\u00e3o de seus efeitos, em mam\u00edferos. Para observar os efeitos induzidos pelo extrato metan\u00f3lico de\u00a0G. amphibium<\/em>\u00a0\u201cin vivo\u201d<\/em>, especificamente na microcircula\u00e7\u00e3o e em fibras musculares de camundongos, foi empregada a t\u00e9cnica de microscopia intravital. Para tanto, a cepa CCIBT 920 \u2013\u00a0G. amphibium<\/em>\u00a0coletada na Represa Guarapiranga e mantida no Banco de Cultura de Cianobact\u00e9rias do N\u00facleo de Pesquisas em Ficologia do Instituto de Bot\u00e2nica de S\u00e3o Paulo foi cultivada sob as seguintes condi\u00e7\u00f5es: meio ASM-1, temperatura de 23\u00b12oC, irradi\u00e2ncia 40 – 50 \u00b5mol.f\u00f3tons.m-2.s-1 e 14 – 10h claro-escuro.<\/p>\n

A biomassa, obtida na fase exponencial de crescimento da cultura, foi liofilizada, pesada, extra\u00edda com metanol\/\u00e1gua 75:25 (v\/v) sob a a\u00e7\u00e3o de ultra-som e centrifugada (4x). Os sobrenadantes reunidos foram concentrados sob press\u00e3o reduzida e esse extrato metan\u00f3lico seco foi empregado em testes por microscopia intravital. Os animais utilizados nesses ensaios (Camundongos Swiss, com peso entre 19 e 21 g), ap\u00f3s serem anestesiados com pentobarbital s\u00f3dico (Hypnol\u00ae Crist\u00e1lia; 50 mg.kg-1), tiveram o m\u00fasculo cremaster exposto, para observa\u00e7\u00e3o direta da rede microcirculat\u00f3ria. Nos ensaios pr\u00e9vios, foram avaliados os efeitos de tr\u00eas doses (20, 40 e 120 \u00b5g) do extrato metan\u00f3lico de\u00a0G. amphibium<\/em>, administradas topicamente. Posteriormente, foram observados os efeitos de cinco doses [6, 125, 250, 500 e 1000 mg.kg-1 de peso corp\u00f3reo (p.c.)], administradas intraperitonealmente (i.p.); para cada dose administrada i.p. foram observados dois per\u00edodos de incuba\u00e7\u00e3o: 30 e 120 minutos.<\/p>\n

Como controle negativo, foi utilizada solu\u00e7\u00e3o salina est\u00e9ril e para todos os ensaios foram feitas tr\u00eas repeti\u00e7\u00f5es (n=3). As doses de 20 e 40 \u00b5g, administradas topicamente, n\u00e3o causaram altera\u00e7\u00f5es na microcircula\u00e7\u00e3o ou nas fibras musculares, por\u00e9m a dose de 120 \u00b5g induziu estase venular transit\u00f3ria e dep\u00f3sitos de fibrina em arter\u00edolas, al\u00e9m do aumento do n\u00famero de leuc\u00f3citos. As doses de 125 e 250 mg.kg-1 p.c., administradas i.p., nos dois per\u00edodos de incuba\u00e7\u00e3o, foram capazes de induzir aumento do n\u00famero de leuc\u00f3citos e estase venular parcial; a dose de 500 mg.kg-1, ap\u00f3s per\u00edodo de incuba\u00e7\u00e3o de 30 minutos, causou estase venular parcial e ap\u00f3s per\u00edodo de 120 minutos causou estase venular e arteriolar; a dose de 1000 mg.kg-1 causou estase venular e arteriolar, nos dois per\u00edodos de incuba\u00e7\u00e3o.<\/p>\n

Estes resultados mostram que o extrato de\u00a0G. amphibium<\/em>\u00a0possui atividade pr\u00f3-inflamat\u00f3ria dose e tempo-dependente, sendo que as doses menores (125 e 250 mg.kg-1) causam aumento do n\u00famero de leuc\u00f3citos rolantes e estase venular parcial e as doses elevadas (500 e 1000 mg.kg-1), inj\u00faria isqu\u00eamica. O extrato metan\u00f3lico de\u00a0G. amphibium<\/em>\u00a0foi submetido a fracionamento por Cromatografia em Camada Delgada em gel de s\u00edlica e as fra\u00e7\u00f5es obtidas foram avaliadas quanto \u00e0 presen\u00e7a de atividade pr\u00f3-inflamat\u00f3ria, segundo o mesmo protocolo observado para o estudo do extrato metan\u00f3lico. Essas fra\u00e7\u00f5es foram tamb\u00e9m submetidas a estudos cromatogr\u00e1ficos por CLAE e \u00e0 Espectrometria de Massas (MALDI-MS). Os dados obtidos nesses estudos indicam que a atividade pr\u00f3- inflamat\u00f3ria apresentada pelo extrato metan\u00f3lico de\u00a0G. amphibium\u00a0<\/em>deve-se principalmente \u00e0s subst\u00e2ncias presentes na fra\u00e7\u00e3o 5, podendo ainda, haver sinergismo entre esta e as fra\u00e7\u00f5es 3, 4 e 6.<\/p>\n

Palavras-chave: Cyanobacteria,\u00a0Geitlerinema amphibium,\u00a0<\/em>intravital,\u00a0cianotoxinas.<\/p>\n

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\"pdf_grande\"<\/a>Camila Ranzatto Dogo
\nCARACTERIZA\u00c7\u00c3O DOS EFEITOS T\u00d3XICOS DA FRA\u00c7\u00c3O ATIVA DA CEPA SPC 920 Geitlerinema amphibium<\/em> (CYANOPHYCEAE, OSCILLATORIALES) NA MICROCIRCULA\u00c7\u00c3O E EM FIBRAS MUSCULARES: AN\u00c1LISE POR MICROSCOPIA INTRAVITAL.<\/a><\/p>\n

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\u00a0VOLTAR AS DISSERTA\u00c7\u00d5ES E TESES<\/a><\/strong><\/p>\n

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Camila Ranzatto Dogo No dia 23 de mar\u00e7o de 2010, a aluna do Programa de P\u00f3s-Gradua\u00e7\u00e3o em Biodiversidade Vegetal e Meio Ambiente do Instituto de Bot\u00e2nica de S\u00e3o Paulo, Camila Ranzatto Dogo (Bolsista CAPES), defendeu sua disserta\u00e7\u00e3o de mestrado intitulada \u201cCaracteriza\u00e7\u00e3o dos efeitos t\u00f3xicos da fra\u00e7\u00e3o ativa da cepa CCIBt 920\u00a0Geitlerinema\u00a0amphibium\u00a0(Cyanophyceae, Oscillatoriales) na microcircula\u00e7\u00e3o e […]<\/p>\n","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"parent":249,"menu_order":0,"comment_status":"closed","ping_status":"closed","template":"fullpage.php","meta":[],"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/www.infraestruturameioambiente.sp.gov.br\/pgibt\/wp-json\/wp\/v2\/pages\/1098"}],"collection":[{"href":"https:\/\/www.infraestruturameioambiente.sp.gov.br\/pgibt\/wp-json\/wp\/v2\/pages"}],"about":[{"href":"https:\/\/www.infraestruturameioambiente.sp.gov.br\/pgibt\/wp-json\/wp\/v2\/types\/page"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.infraestruturameioambiente.sp.gov.br\/pgibt\/wp-json\/wp\/v2\/users\/1"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.infraestruturameioambiente.sp.gov.br\/pgibt\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=1098"}],"version-history":[{"count":0,"href":"https:\/\/www.infraestruturameioambiente.sp.gov.br\/pgibt\/wp-json\/wp\/v2\/pages\/1098\/revisions"}],"up":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.infraestruturameioambiente.sp.gov.br\/pgibt\/wp-json\/wp\/v2\/pages\/249"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/www.infraestruturameioambiente.sp.gov.br\/pgibt\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=1098"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}